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哪些原因容易導(dǎo)致PAN胎牛血清沉淀：

哪些原因容易導(dǎo)致PAN胎牛血清沉淀：1.溫度改變太大，血清由-20℃直接放入37℃解凍，因溫度改變劇烈容易導(dǎo)致沉淀。2.血清在室溫或4℃冰箱放置時(shí)間太久，血清中的不穩(wěn)定成分會(huì)被破壞，影響細(xì)胞生長效果；導(dǎo)致血清品質(zhì)變差，也會(huì)產(chǎn)生沉淀。3.血清分裝凍存時(shí)，注意在不產(chǎn)生氣泡的情況下?lián)u晃均勻，避免因血清成分濃度改變產(chǎn)生沉淀。4.血清滅活后容易產(chǎn)生沉淀，如需使用滅活血清，請(qǐng)按56℃，30分鐘，輕微搖晃原則操作，滅活溫度過高、時(shí)間過長、搖晃不均都容易產(chǎn)生沉淀。5.如有血清沉淀，分裝后進(jìn)行...

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進(jìn)口胎牛血清需要熱滅活嗎？

進(jìn)口胎牛血清需要熱滅活嗎？何謂熱滅活？一般是以56C，30分鐘來處理已解凍的血清，因?yàn)榇思訜岵襟E，可以使補(bǔ)體去活化，而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性，平滑肌的收縮，肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放，增強(qiáng)吞噬作用，淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和激活。我需要滅活血清嗎？–實(shí)驗(yàn)顯示，經(jīng)過正確處理的熱滅活血清，對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對(duì)細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn)，或*沒有任何作用，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量，而造成細(xì)胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清，沉淀物的形...

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細(xì)胞培養(yǎng)為什么要加入胎牛血清

細(xì)胞培養(yǎng)為什么要加入胎牛血清許多臨床和做科研的小伙伴們都要涉及到細(xì)胞培養(yǎng)，在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，血清無疑成為影響實(shí)驗(yàn)成功與否的重要因素，而在眾多血清之中，牛血清是最為常用的。牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基，其中含有豐富的細(xì)胞生長所必須的營養(yǎng)成份，常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。牛血清是一種成分復(fù)雜的混合物，而且血清的組成及含量通常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營養(yǎng)條件不同而存在差異。牛血清主要成分有蛋白質(zhì)，多肽類，激素類，其他成分如氨基酸、葡萄糖、微量元...

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關(guān)于胎牛血清熱滅活的問題

關(guān)于胎牛血清熱滅活的問題成為常規(guī)操作的血清熱滅活至少70%的研究者對(duì)血清的滅活僅僅是因?yàn)樽裾粘Ｒ?guī)操作，或者說認(rèn)為是理所當(dāng)然的。常規(guī)滅活建議的溫度在45℃到62℃之間，而時(shí)間則從15分鐘到60分鐘不等，其中常用的手法是56℃熱處理30分鐘。隨著血清采集、處理、加工工藝的提高，許多早先認(rèn)為是熱滅活的原因已經(jīng)不再成立，只有少數(shù)對(duì)血清進(jìn)行熱滅活的研究者在實(shí)驗(yàn)中證實(shí)了這一步驟的有效性和必要性。熱敏補(bǔ)體與熱滅活熱滅活目的是為了去除血清中補(bǔ)體等對(duì)熱敏感的物質(zhì)，但是在胎牛血清中對(duì)補(bǔ)體的滅活則...

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千舍~教你一眼判斷血清的質(zhì)量

教你一眼判斷血清的質(zhì)量淡黃色，透明——2小時(shí)以內(nèi)的國產(chǎn)新生牛血清，膽紅素含量較少；金黃色，透明——產(chǎn)下較長時(shí)間的新生牛血清，一般超過2小時(shí)了；金黃色，不透明——產(chǎn)下幾天或更久的小牛血清；淡黃色，帶一點(diǎn)微紅，透明——等級(jí)最高的進(jìn)口胎牛血清，如特級(jí)的北美；淡紅色，透明——普通的進(jìn)口胎牛血清；紅色偏深，透明——普通的進(jìn)口胎牛血清，南美的居多，采血環(huán)節(jié)不夠嚴(yán)謹(jǐn)；紅色偏暗，透明——普通胎牛血清，保存不好，血紅蛋白氧化了；紅色，不透明——進(jìn)口小牛血清，透明度越差，牛齡越大。

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細(xì)胞凍存&細(xì)胞復(fù)蘇

03細(xì)胞凍存：試劑：凍存液，PBS，胰酶，含血清的培養(yǎng)基；流程：要凍存，先配置凍存液，凍存液包含了：DMSO：防止在低溫（零度以下至-196℃）保存細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞內(nèi)液會(huì)形成冰晶，滲透壓會(huì)發(fā)生改變，細(xì)胞結(jié)構(gòu)會(huì)出現(xiàn)紊亂，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)損傷。凍存液制備時(shí)，一般需與血清一起配置：因?yàn)閮烧呋ト跁r(shí)，會(huì)散發(fā)熱量，所以凍存液需提前制備。因?yàn)榧?xì)胞太多了，需要凍存，所以要先看一看，吸一吸，洗一洗，分一分，中和一下，吹打制成細(xì)胞懸液，離心，吸掉上清液，加入凍存液，輕輕吹吸均勻，每管等量1ml裝入凍存...

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PAN胎牛血清的解凍正確方法

PAN胎牛血清的解凍正確方法胎牛血清的正確存放與解凍是各位實(shí)驗(yàn)家尤為關(guān)注的一個(gè)問題，在保證質(zhì)量的前提下，胎牛血清的正確存放與解凍的方法總結(jié)如下：1）胎牛血清從冷凍箱取出后，先置于2-8℃的冰箱使之全融。但必須注意的是，溶解過程中必須規(guī)則的搖晃均勻；2）長時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí)，血清中的各種蛋白和脂蛋白可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此，推薦在-20℃以下存儲(chǔ)血清，避免反復(fù)凍融。3）建議血清硬保存在-20℃條件下。若存放于4℃時(shí)，請(qǐng)勿超過1個(gè)月。若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝...

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如何避免細(xì)胞培養(yǎng)過程中的污染?

如何避免細(xì)胞培養(yǎng)過程中的污染?主要還是考慮無菌環(huán)境，盡量做好操作臺(tái)的滅菌，別把培養(yǎng)基滴落在生物安全柜的入風(fēng)口，別在培養(yǎng)箱里把培養(yǎng)基打翻。這兩個(gè)地方霉菌一旦滋生，那你就只能等著用甲醛熏蒸了。紫外無法殺滅霉菌，酒精也不行，只能用甲醛熏蒸，但是一定要注意安全。復(fù)蘇的時(shí)候，水浴鍋也需要進(jìn)行滅菌處理。一旦出現(xiàn)污染，不要急，能救的就用抗生素救一下，但是一般情況下，選擇扔掉。避免交叉感染，要不只能整個(gè)實(shí)驗(yàn)室消毒了。如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí)，應(yīng)如何處理？原則上：直接滅菌后丟棄之。當(dāng)重要的培養(yǎng)...

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