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購買細(xì)胞注意事項(xiàng)

購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。運(yùn)輸過程對細(xì)胞有嚴(yán)重影響。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久。細(xì)胞抱團(tuán)怎么處理？一些懸浮細(xì)胞抱團(tuán)生長是正?，F(xiàn)象，大部分懸浮細(xì)胞在細(xì)胞密度很高的情況下，很可能會(huì)出現(xiàn)部分細(xì)胞抱團(tuán)生長的現(xiàn)象，聚團(tuán)細(xì)胞很容易死亡并演化成絮狀物，殃及周圍的懸浮細(xì)胞，因此在培養(yǎng)懸浮細(xì)...

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胎牛血清品質(zhì)的正確認(rèn)識

胎牛血清品質(zhì)的正確認(rèn)識1）胎牛血清是品質(zhì)高的，因?yàn)樘ヅ＿€未接觸外界，血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對細(xì)胞有害的成分最少；2）應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛，新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛；3）由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物，含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機(jī)物等，這些物質(zhì)對促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。胎牛血清的解凍正確方法胎牛血清的正確存放與解凍是各位實(shí)驗(yàn)家尤為關(guān)注的一個(gè)問題，在保證質(zhì)量的前提下...

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ELISA試劑盒常見問題

ELISA試劑盒常見問題01問：看說明書里，如果樣本濃度高，可以不用稀釋，直接加原液。這個(gè)直接加血清原液，你們自己親自做過嗎？因?yàn)橹拔覀冇脛e家的，他們說明書里，加樣是：10微升樣品加40微升樣品稀釋液。咨詢他們?nèi)绻绻麧舛雀?，可以加原液嗎？他們說可以，可能他們沒做過，說可以?？晌覀冏隽耍豢梢?。問他們，又說是可能離子濃度不夠。答：ELISA試劑盒檢測范圍是固定的，樣本是否稀釋是根據(jù)樣本實(shí)際濃度來選擇的，但前提條件樣本要落在檢測范圍內(nèi)，濃度高于檢測范圍，稀釋樣本達(dá)到檢測范圍內(nèi)...

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ELISA試劑盒代測之 固體樣本處理問題

固體樣本處理問題01組織樣本操作流程：1、組織樣本必須保持鮮重，如果是凍存的組織，應(yīng)該室溫平行2小時(shí)以上，然后用生理鹽水沖洗干凈，再用濾紙把周圍的水分吸干，稱重！組織重量不能低于50mg。2、組織勻漿液選取是PBS（PH=7.2-7.4，濃度為0.01mol/L）勻漿的比例為1:10，相當(dāng)于1g組織加9ml的勻漿液。3、組織勻漿后，離心取上清，離心轉(zhuǎn)數(shù)為5000轉(zhuǎn)，但不能超過5000轉(zhuǎn)，時(shí)間為15分鐘。4、實(shí)驗(yàn)中老師樣本提取的是200mg的樣本加1.8ml的勻漿液。02土壤樣...

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細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點(diǎn)是是什么 ? 如何處理?

細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點(diǎn)是是什么?如何處理?1.一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長的狀態(tài)，黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細(xì)胞被污染，微生物則會(huì)大量繁殖，培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細(xì)胞，生長狀態(tài)良好，與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比，沒有任何變化，那么，黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān)：(1)細(xì)胞生長過老，破碎的細(xì)胞殘?。?2)配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細(xì)胞生長；(3)培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn)，可...

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胎牛血清和新生牛血清的有何區(qū)別，如何選擇？

胎牛血清和新生牛血清的有何區(qū)別，如何選擇？兩者所含的促細(xì)胞因子、促貼附因子、IgG等其他活性物質(zhì)等組分與比例均有不同，進(jìn)口和部分國產(chǎn)胎牛血清通過心臟穿刺采血，而還有部分國產(chǎn)胎牛血清采自出生后8小時(shí)內(nèi)的胎牛血。Cell-Box采血工作人員經(jīng)過長達(dá)18個(gè)月以來的血源地篩選，通過一系列指標(biāo)檢測及試驗(yàn)對照，以極其苛刻的標(biāo)準(zhǔn)要求精選了國內(nèi)外優(yōu)質(zhì)的血源地，并簽署了合作協(xié)定。每批次血清經(jīng)過批量混合后，連續(xù)3級0.1um精過濾制成。在定量灌裝后，又通過一系列的指標(biāo)檢測、多種細(xì)胞的培養(yǎng)測試和符...

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細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點(diǎn)是污染嗎 ? 如何處理?

1.一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長的狀態(tài)，黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細(xì)胞被污染，微生物則會(huì)大量繁殖，培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細(xì)胞，生長狀態(tài)良好，與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比，沒有任何變化，那么，黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān)：(1)細(xì)胞生長過老，破碎的細(xì)胞殘??；(2)配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細(xì)胞生長；(3)培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn)，可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除...

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不同批次血清顏色為什么有差異？

這是在胎牛血清使用過程中，常常出現(xiàn)的問題，關(guān)于這個(gè)問題的解答如下：1.血清中含有微量的血紅蛋白，與采集血液過程中細(xì)胞的破裂數(shù)目有關(guān)。只要血紅蛋白的含量在藥典規(guī)定范圍內(nèi)，顏色的深淺和血清品質(zhì)無關(guān)，不影響細(xì)胞培養(yǎng)。國家藥典規(guī)定≤20mg/dL（注：1dL=100ml），也寫作＜0.02%（w/v）。1.培養(yǎng)嬌貴原代細(xì)胞或干細(xì)胞，建議選用澳洲血源或新西蘭血源的FBS，由于國內(nèi)市場FBS品種繁多雜亂，其中，不乏水貨、假貨，極易混淆用戶的選購視線。為節(jié)省用戶的寶貴時(shí)間及進(jìn)度，且應(yīng)選擇能...

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