2022-617
細胞污染防治方法1.細菌污染細菌污染是細胞培養(yǎng)中最常見的污染,主要由操作不慎或使用了滅菌不*的耗材與試劑引入。最常見的有枯草桿菌、大腸桿菌、假單胞菌及白色葡萄球菌。鏡下形態(tài)則為長桿狀、短桿狀和顆粒狀等。左邊的就是比較典型的桿菌污染,一般桿菌會延軸向快速游動,量少時培養(yǎng)基澄清。右圖是顆粒狀污染,一般培養(yǎng)基會渾濁或有白色沙狀沉淀。好氧菌增殖分裂迅速,感染24h內(nèi)即可使培養(yǎng)基渾濁;厭氧菌在常規(guī)細胞培養(yǎng)條件下增殖緩慢,需要較長時間才會觀察到渾濁現(xiàn)象。污染處理:由于國內(nèi)細胞培養(yǎng)中抗生素...
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2022-617
實驗室細胞污染防治建立良好的規(guī)章制度對減少細胞污染會有很大的幫助。包括準入制度、操作規(guī)范和日常管理制度。準入制度:包括了人員的和物料的。人員需要進行培訓(xùn)之后才能自己進行操作,而且要符合穿戴要求才能進實驗室,如白大褂、隔離服,口罩,手套等。而所需用到的物品,非一次性的物品應(yīng)嚴格消毒滅菌,而購買的物品需要從正規(guī)的、可靠的渠道購買。新買的細胞應(yīng)檢測驗證后再使用。操作規(guī)范:對于常規(guī)操作最好制定規(guī)范,且實驗室人員都要按操作規(guī)范進行,不能隨意更改,同時也是培養(yǎng)實驗人員的良好操作習(xí)慣。比如...
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2022-616
對中國品牌的質(zhì)疑20多年生物領(lǐng)域快速發(fā)展,胎牛血清一直依賴進口,國產(chǎn)血清通常只能提供新生牛血清,且對于科研客戶養(yǎng)多種細胞來講,新生牛往往無法滿足各種細胞的培養(yǎng)效果。因而國產(chǎn)血清被理解為新生牛血清,且質(zhì)量不穩(wěn)定。小牛出生2小時之內(nèi)不吃母乳的情況下采血,屬新生牛血清。中國品牌胎牛血清的崛起如:WINSERA為中國品牌胎牛血清,血源來自澳洲,中國內(nèi)蒙古等優(yōu)質(zhì)牧場,在國內(nèi)采用美國Hyclone進口生產(chǎn)線加工生產(chǎn)。血清等級系列化,能滿足不同類型細胞的培養(yǎng),得到了細胞生物學(xué)領(lǐng)域?qū)<覍W(xué)者的...
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2022-616
WinSera®胎牛血清為細胞而生胎牛血血清現(xiàn)狀:我國嚴格禁止進口產(chǎn)自瘋牛病、藍舌病等疫區(qū)的胎牛血清,目前澳洲、北美、南美胎牛血清目前仍處于禁止進口狀態(tài),因此國內(nèi)市場上進口胎牛血清存貨漸少,價格不斷攀升,導(dǎo)致胎牛血清,特別是雜牌血清高仿行為日益猖獗。中國品牌胎牛血清隨著心臟密閉穿刺采血技術(shù)的改進,血清品質(zhì)幾乎可以替代南美胎牛血清。品質(zhì)好,價格低,持續(xù)供應(yīng)等已經(jīng)越來越受到客戶的青睞。進口品牌胎牛血清眾多,且市場混雜在科研市場你會聽到很多很多的血清品牌,如H、G、C、B、...
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2022-614
問:倍增和代數(shù)有什么區(qū)別?答:倍增是培養(yǎng)物中細胞總數(shù)加倍,通常是指細胞指數(shù)或?qū)?shù)生長期.代數(shù)是指細胞群從培養(yǎng)瓶中移出,傳代培養(yǎng)過程的次數(shù),傳代培養(yǎng)的目的是使細胞處于低密度以刺激其進一步生長.問:正常人類細胞能傳多少代?答:ScienCell不使用代數(shù)描述細胞的生長潛能,因為每一位客戶用不同的傳代比例.ScienCell研究室會在細胞產(chǎn)品說明書中標注倍增次數(shù)。問:非增殖細胞能傳代培養(yǎng)嗎?答:非增殖細胞不能進行傳代培養(yǎng),因為他們不能增殖。非增殖細胞包括:神經(jīng)元,小膠質(zhì)細胞,巨噬細...
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2022-613
WINSERA胎牛血清為什么要熱滅活血清?有必要做熱滅活嗎?加熱可以滅活血清中的補體系統(tǒng),使補體去活化。通常未滅活的補體能夠刺激平滑肌收縮、肥大細胞和血小板組胺的釋放、激活淋巴細胞和巨噬細胞,同時還能夠參與溶解細胞的過程。諸多研究表明大多數(shù)細胞的培養(yǎng)無須進行血清的熱滅活;而在免疫學(xué)研究和ES細胞、昆蟲細胞、平滑肌細胞的培養(yǎng)過程中,推薦使用熱滅活血清。實驗顯示,經(jīng)正確熱滅活處理的血清,對細胞的生長只有微小的促進或*沒有促進作用,而通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量,造成細胞生長速...
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2022-610
細胞生長逐漸變慢是什么原因?細胞增殖變慢有以下原因:1.消化過度2.傳代過密3.細胞營養(yǎng)不良4.細胞頻繁傳代5.細胞狀態(tài)不佳或老化6.細胞存在污染。培養(yǎng)細胞時應(yīng)使用5%或10%CO2?一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng),而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細胞培養(yǎng)時應(yīng)使用的CO2濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7g時,細胞培養(yǎng)時應(yīng)使用10%CO2;當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5g時,則應(yīng)使用5%CO2培養(yǎng)細胞。CO2培養(yǎng)箱之水盤...
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2022-610
培養(yǎng)中常出現(xiàn)一些黑點,是污染嗎?首先肉眼觀察培養(yǎng)液是否變渾濁,如果變渾濁,基本可以確定是污染;如果肉眼觀察培養(yǎng)液沒有變渾濁:在顯微鏡下觀察黑點大小和形狀是否規(guī)則,是否運動,是做布朗運動還是呈直線型快速移動。如果黑點大小不規(guī)則,做布朗運動,黑點可能是細胞碎片(可能是細胞狀態(tài)不佳或者消化過度引起的),也可能是血清反復(fù)凍融產(chǎn)生的蛋白沉淀引起的,也可能是細胞的代謝產(chǎn)物。如果黑點大小一致,快速移動,很可能是細菌污染。如何預(yù)防細胞培養(yǎng)中黑點的產(chǎn)生?掌握細胞傳代的最佳時機,不要細胞長老了再...
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