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千舍——WinSera系列胎牛血清如何選擇？

對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)而言，胎牛血清的重要性不言而喻。胎牛血清既是讓細(xì)胞快樂成長(zhǎng)的需要營(yíng)養(yǎng)物，又是可能導(dǎo)致細(xì)胞死亡的“原因”。辛苦養(yǎng)起來的細(xì)胞可能因?yàn)樘ヅＱ逵缅e(cuò)而一切歸零……那么胎牛血清作為細(xì)胞培養(yǎng)最關(guān)鍵的原料之一，胎牛血清的質(zhì)量直接決定培養(yǎng)細(xì)胞的成敗，千舍生物為各科研人員推薦以下幾款血清：一、干細(xì)胞專用胎牛血清（低內(nèi)毒素FBS500-WE-002(ES)）千舍生物嚴(yán)格控制胎牛血清的來源，做好檢驗(yàn)檢疫與溯源等工作，心臟穿刺采血低溫分離，3次0.1μm無菌過濾，內(nèi)毒素≤3EU/ml，可...

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細(xì)胞計(jì)數(shù)方法

原理：當(dāng)待測(cè)細(xì)胞懸液中細(xì)胞均勻分布時(shí)，通過測(cè)定一定體積懸液中的細(xì)胞的數(shù)目即可換算出每mL細(xì)胞懸液中的細(xì)胞數(shù)量。操作步驟：1.將計(jì)數(shù)板及蓋玻片擦拭干凈，并將蓋玻片蓋在計(jì)數(shù)板上；2.輕輕吹打細(xì)胞懸液，使細(xì)胞均勻分布；吸出少許細(xì)胞懸液滴在細(xì)胞入口，使細(xì)胞懸液充滿蓋玻片和計(jì)數(shù)板之間，靜置1-2min，使細(xì)胞沉降；注意蓋玻片下不要有氣泡，也避免細(xì)胞懸液進(jìn)入旁邊的槽中；3.在顯微鏡下對(duì)A/B/C/D四個(gè)大格內(nèi)的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，壓在大格四周邊線上的細(xì)胞只計(jì)數(shù)壓在2條邊線上的細(xì)胞（如右側(cè)和下方...

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細(xì)胞傳代操作步驟如何

一、貼壁細(xì)胞傳代（以一個(gè)T25瓶為例）1、吸出原培養(yǎng)液；2、加入2ml左右PBS，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞，吸出PBS丟棄；3、加入1ml左右胰酶，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤(rùn)所有細(xì)胞，放入培養(yǎng)箱消化；4、消化時(shí)間跟據(jù)細(xì)胞特性有所不同，顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯分離變圓，側(cè)立培養(yǎng)瓶細(xì)胞可以滑落時(shí)可終止消化，全程不要拍打培養(yǎng)瓶；5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，吹打細(xì)胞使之脫落并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞，使之盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液，這時(shí)可以在顯微鏡看下；6、收集細(xì)胞懸液離心，1...

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如何避免細(xì)胞污染，千舍有妙招

1.實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，超凈臺(tái)用紫外燈照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面，并開啟超凈臺(tái)風(fēng)機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)5-10min再開始實(shí)驗(yàn)操作。2.實(shí)驗(yàn)用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺(tái)內(nèi)；實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)移出超凈臺(tái)，以利于空氣的流通；實(shí)驗(yàn)完成后用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面。3.每次操作只處理一種細(xì)胞；即使不同細(xì)胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基，避免細(xì)胞間的交叉污染。4.操作時(shí)小心取用無菌的物品，避免污染。勿碰觸吸管尖頭，不小心碰觸后應(yīng)立即更換；不要在打開的容器瓶口正上方操作，容...

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胎牛血清的內(nèi)毒素含量多少為宜？

有下列情況者，對(duì)血清內(nèi)毒素應(yīng)格外留意篩選：1.養(yǎng)干細(xì)胞時(shí)，干細(xì)胞對(duì)內(nèi)毒素非常敏感，如果血清中內(nèi)毒素≥3EU/ml時(shí)，干細(xì)胞很容易死亡。很多使用者，在血清在試用前，就通過提早審核該批次《檢測(cè)報(bào)告》，以決定是否入圍進(jìn)行試用。2.養(yǎng)免疫細(xì)胞時(shí)，過高的內(nèi)毒素可誘導(dǎo)免疫細(xì)胞釋放炎癥因子，抑制小鼠紅細(xì)胞集落的形成等。3.基因敲除相關(guān)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，培養(yǎng)的細(xì)胞要盡可能保持其原始狀態(tài)，任何引導(dǎo)細(xì)胞衰老或凋亡的試劑，都會(huì)讓后續(xù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果“失之毫厘，謬以千里”。在準(zhǔn)備血清和其他試劑時(shí)，選擇極低的內(nèi)毒...

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WINSERA®胎牛血清有哪些重要指標(biāo)

胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份，常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物，以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白，能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用。4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑，使在細(xì)胞傳代時(shí)使...

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如何避免細(xì)胞的污染

1.實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，超凈臺(tái)用紫外燈照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面，并開啟超凈臺(tái)風(fēng)機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)5-10min再開始實(shí)驗(yàn)操作。2.實(shí)驗(yàn)用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺(tái)內(nèi)；實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)移出超凈臺(tái)，以利于空氣的流通；實(shí)驗(yàn)完成后用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面。3.每次操作只處理一種細(xì)胞；即使不同細(xì)胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基，避免細(xì)胞間的交叉污染。4.操作時(shí)小心取用無菌的物品，避免污染。勿碰觸吸管尖頭，不小心碰觸后應(yīng)立即更換；不要在打開的容器瓶口正上方操作，容...

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細(xì)胞不貼壁的原因及解決辦法？

細(xì)胞培養(yǎng)過程中容易出現(xiàn)這樣或那樣的問題，這些問題都是在細(xì)胞生長(zhǎng)方面來說，比如細(xì)胞的不貼壁、生長(zhǎng)緩慢、生長(zhǎng)不好，甚至死亡的原因，這些問題使得細(xì)胞研究者很是頭疼，下面是針對(duì)這些問題的原因和解決方法：一、培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁可能原因：1.胰蛋白酶消化過度；2.支原體污染；3.培養(yǎng)基pH值過堿（NaHCO3分解）；4.細(xì)胞老化；5.接種細(xì)胞起始濃度太低或太高。解決方法：1.縮短胰蛋白酶消化時(shí)間或降低胰蛋白酶濃度；2.分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。清潔支架或培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染，丟棄培養(yǎng)物；3...

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